Loading

Productカネカ簡易RNA抽出キット (RT-PCR用)(研究用)

適用検体種・使用例・掲載論文

適用検体種

その他 適用検体種

  • 鳥/脳組織、糞便
  • 牛/膣粘膜(VMM)

使用例

使用例1 培養細胞からのRNA抽出及びRT-PCRによる検出結果

105個に調整した接着細胞(HEK293T)または浮遊細胞(Jurkat)から、本品を用いてそれぞれのRNAを抽出した。抽出液を鋳型RNAとし、PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2(タカラバイオ社製)を用いて、T3000 Thermocycler(Biometra社製)にてACTB mRNAを標的としたRT-PCRを実施した。RT-PCR産物を電気泳動に供し、鋳型RNA特異的な増幅断片を検出した(図1,2)。また、検体に含まれるゲノムDNAが抽出液に残存していないことを確認するため、抽出液を鋳型とし、TaKaRa Ex Taq(タカラバイオ社製)を用いてT3000 Thermocycler(Biometra社製)にてPCRを実施した。PCR後の溶液を電気泳動に供し、増幅断片が検出されないことを確認した(図1,2)。

培養細胞からのRNA抽出及びRT-PCRによる検出結果(図1),培養細胞からのRNA抽出及びRT-PCRによる検出結果(図2)

使用例2 マウス血液からのRNA抽出及びRT-PCRによる検出結果

抗凝固剤としてヘパリンを添加したマウス血液から、本品を用いてRNAを抽出した。抽出液を鋳型RNAとし、PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2(タカラバイオ社製)を用いて、T3000 Thermocycler(Biometra社製)にてH3f3a mRNAを標的としたRT-PCRを実施した。RT-PCR産物を電気泳動に供し、鋳型RNA特異的な増幅断片を検出した。また、検体に含まれるゲノムDNAが抽出液に残存していないことを確認するため、抽出液を鋳型とし、TaKaRa Ex Taq(タカラバイオ社製)を用いてT3000 Thermocycler(Biometra社製)にてPCRを実施した。PCR後の溶液を電気泳動に供し、増幅断片が検出されないことを確認した。

マウス血液からのRNA抽出及びRT-PCRによる検出結果

掲載論文情報