Productカネカ簡易RNA抽出キット (RT-PCR用)(研究用)
適用検体種・使用例・掲載論文
適用検体種
その他 適用検体種
- 鳥/脳組織、糞便
- 牛/膣粘膜(VMM)
使用例
使用例1 培養細胞からのRNA抽出及びRT-PCRによる検出結果
105個に調整した接着細胞(HEK293T)または浮遊細胞(Jurkat)から、本品を用いてそれぞれのRNAを抽出した。抽出液を鋳型RNAとし、PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2(タカラバイオ社製)を用いて、T3000 Thermocycler(Biometra社製)にてACTB mRNAを標的としたRT-PCRを実施した。RT-PCR産物を電気泳動に供し、鋳型RNA特異的な増幅断片を検出した(図1,2)。また、検体に含まれるゲノムDNAが抽出液に残存していないことを確認するため、抽出液を鋳型とし、TaKaRa Ex Taq(タカラバイオ社製)を用いてT3000 Thermocycler(Biometra社製)にてPCRを実施した。PCR後の溶液を電気泳動に供し、増幅断片が検出されないことを確認した(図1,2)。
使用例2 マウス血液からのRNA抽出及びRT-PCRによる検出結果
抗凝固剤としてヘパリンを添加したマウス血液から、本品を用いてRNAを抽出した。抽出液を鋳型RNAとし、PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2(タカラバイオ社製)を用いて、T3000 Thermocycler(Biometra社製)にてH3f3a mRNAを標的としたRT-PCRを実施した。RT-PCR産物を電気泳動に供し、鋳型RNA特異的な増幅断片を検出した。また、検体に含まれるゲノムDNAが抽出液に残存していないことを確認するため、抽出液を鋳型とし、TaKaRa Ex Taq(タカラバイオ社製)を用いてT3000 Thermocycler(Biometra社製)にてPCRを実施した。PCR後の溶液を電気泳動に供し、増幅断片が検出されないことを確認した。
掲載論文情報
- 【鳥/培養細胞、脳組織、糞便】
Development of a reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification assay for the detection of parrot bornavirus 4 - 【牛/膣粘膜(VMM)】
Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) and machine learning application for early pregnancy detection using bovine vaginal mucosal membrane - 【ヒラメ/HINAE細胞】
Isolation and characterization of hirame aquareovirus (HAqRV): A new Aquareovirus isolated from diseased hirame Paralichthys olivaceus